我在做一种比较新的蛋白(之前没有研究报道),焦头烂额的。在细胞里面过表达这种蛋白质,用RIPA(强)裂解之后做WB一直无法检测到,一直以为是过表达不成功,结果用尿素裂解液就做出来了。想问问各位大神
我现在先描述一个细菌裂解的protocol:菌体用tris(ph8.0)25mM的蔗糖溶液重悬,然后加入,DNA酶,RNA酶,溶菌酶37度30min,然后加入裂解液(EDTA,脱氧胆酸钠,和尿素
打算测定细胞MDA SOD含量, 实验室没有条件超声破碎,只能用triton x-100裂解细胞,可该试剂裂解的时间是多长?还有加入的triton x 100的量是多少?有没有做过的或者最近在做
请问大家,测定细胞内蛋白含量,需要先将细胞裂解,那么不同密度的细胞和所用裂解液的量怎么搭配?如果把细胞以每孔10万个接种到24孔板,那每孔细胞(10万个)应该加多少裂解液呢?还有,请问斑竹
我用的是碧云天的SDS裂解液裂解细胞提蛋白,SDS裂解液从-20℃拿出,4℃融化,融化之后是裂解液浑浊的,所以就在常温下放置几分钟再用于细胞裂解,放在冰上裂解之后又变浑浊了。搜集之后-20℃保存
我做的是外周血的T淋巴细胞分型,主要是检测th1/th2/th17等亚型。需要裂红后固定染色。我用的是400ul的血,加入刺激剂后,培养箱刺激5小时,拿出来加入4ml 1×红裂液,冰上裂解15min
用ficoll分离后,留取红细胞,用红细胞裂解液体积比1:3室温裂解5min后,1500rpm离心5分钟居然出现细胞分层,红细胞在下层而上层透明,怎么回事?请教各位,是否出现这类似情况,是哪里出