小弟有一个疑问,提取蛋白有两种方法,一种是加入裂解液后提取蛋白,然后放入-80度,做WB时直接取出,加入上样缓冲液然后煮沸变性上样。另外一种方法是直接加入上样缓冲液,煮沸裂解细胞,然后放入-80度
BL21表达GST融合蛋白,请问裂解液的配方是怎样的?我查过一些资料,其配方都不完全一样,搞得我好困惑,不知用哪个好。另外请问有哪位大侠用溶菌酶裂解过BL21,是怎样操作的,效果如何?谢谢!
觉得还是用菌液PCR方便,因为量很大,不知道裂解的菌液能放置多久?放久了会不会降解?因为发现用新鲜的裂解菌液作出的结果跟放置了一段时间的,有点不一样。很奇怪。不知道有没有人能解答这个问题。多谢
请问各位大侠用RIPA怎么裂解细胞,下面两种方法哪种好?1.PBS洗细胞,用刮子刮下细胞,1000转离心5分钟,倒掉PBS,将细胞转移到EP管中,加RIPA裂解液,吹打均匀,4度冰箱20分钟
我做关于口腔鳞癌方面的实验,现要做western但前期组织处理我不知选什么裂解液了,请知道的战友帮忙,裂解液好像细胞和组织有区别,还有什么胞膜和胞核蛋白又有区别,而我想在后期测P53蛋白,就不知
最近做P-ERK1/2通路,包括三种胞浆蛋白即ras,erk,mek.两种胞核表达的蛋白,即p90RSK,Elk.试剂购于cell signaling technology.按照说明,蛋白裂解加
想做细菌2-DE ,刚涉及就被裂解液弄懵了 拿下面的配方为例(要加多少啊):7M尿素,(是指尿素加7M么,用分子量换算质量是么)2M硫脲,4%CHAPS,(那这个4%是指浓度还是体积,晕啊)2
搜索了一下本斑,还是有几个问题想请教我要作的是不同培养条件下利用一维电泳来观察蛋白是否有变化,因此想收集全蛋白,胞内胞外的都要。一般超声时要把菌离心洗涤再加裂解液,这样的化我的胞外蛋白就损失