裂解酵母细胞,并提取质膜蛋白,且该蛋白修饰类型不明。请问建议如何选择裂解成分(NP-40, SDS等),和蛋白酶抑制剂(PIC, PMSF, 磷酸酶抑制剂,去泛素化酶抑制剂等)呢?谢谢!
平板中菌落长出来后,没有来得及筛,放在四度冰箱里,渐渐筛选大概第三、四天,裂解液怎么都裂解不开了,ITS都扩不出来,是不是放冰箱有影响。跑胶轻微的引物二聚体,没有条带非常干净,maker清晰。
RIPA细胞裂解液配置最近在做细胞裂解,我要测的指标在细胞里比较低,200万个细胞加了200ul试剂盒的裂解液后吸光度只有0.1几,准度很低,现在想自己配裂解液,我看市面上都是1%Triton,0