贴壁细胞加ripa pmsf离心取上清,没有加loading buffer 就煮了。冻到了-80,这样的蛋白还能做后续的wb和浓度测定吗
RIPA裂解液是一种传统的细胞组织快速裂解液。RIPA裂解液裂解得到的蛋白样品可以用于常规的western、IP等。产品原理:RIPA裂解液是一种较为常用的裂解液。主要利用表面活性剂等裂解细胞
Ripa加进匀浆管里,用匀浆机裂解组织,拿出来的时候发现整个管子基本都是泡沫,后来放在冰上30min,4度13000rpm 10min吸取上清请问产生这么多泡沫会对提取蛋白有影响吗?
我在做一种比较新的蛋白(之前没有研究报道),焦头烂额的。在细胞里面过表达这种蛋白质,用RIPA(强)裂解之后做WB一直无法检测到,一直以为是过表达不成功,结果用尿素裂解液就做出来了。想问问各位大神
昨天做小鼠,处死后取肾皮质,加入ripa+pmsf后,12000r*10min离心,离心后表面有一层絮状物沉淀,再次离心仍然有,请教各位老师是什么呢?会对WB有影响吗?我吸取的时候不管多小心仍
碧云天脂质氧化(MDA)检测试剂盒(产品编号: S0131)在说明书上推荐使用Western及IP细胞裂解液,但是实验室只有ripa裂解液,这种裂解液据说可能会造成干扰(我猜可能是因为裂解太强),想
请问各位战友,我提取细胞总蛋白,加入RIPA刮下细胞的时候,总会刮下那种成团的细胞下来,没办法吹散,裂解一个半小时后还是呈这种白色絮状样,请问有啥办法可以完全裂解
各位战友好,我的实验需要测HepG2细胞BCA,MDA,SOD,CAT等,看文献说用裂解液后还需要离心,但是南京建成SOD试剂盒说直接用裂解后的细胞测就可以了,那么我测这些指标时,裂解细胞到底
我做的是外周血的T淋巴细胞分型,主要是检测th1/th2/th17等亚型。需要裂红后固定染色。我用的是400ul的血,加入刺激剂后,培养箱刺激5小时,拿出来加入4ml 1×红裂液,冰上裂解15min