以前用pET28a表达的蛋白,最近再拿出来表达发现诱导不出来了,所以又重新转化了一次,诱导表达后检测发现:诱导后的整个菌体中有特异性蛋白,但超声后的上清和沉淀(包含体)中都没有发现特异性的蛋白
各位前辈,我要做一个膜蛋白的WB,这个蛋白在胞浆内有,但最终需要被一个成熟因子转移到细胞膜上发挥作用,所以我不确定该如何提取它的蛋白,质膜分离很麻烦,实验室老师说直接提总蛋白就可以,但我需要验证
求大家指点迷津:CO-IP的结果很奇怪?用A蛋白拉B蛋白后的WB结果没有A蛋白,却有B蛋白,请问是什么原因呢?有遇到过类似情况的吗?谢谢指点!
各位,我已经纯化到某一蛋白,也已经做了其N-端序列,但是由于各种原因仅测得8个氨基酸残基,然后在ncbi搜了一下发现有很多蛋白含有该序列,但是并不是在其N端,所以现在无法确定其实什么,那么到底
大家好!我是新手!本来是个做蛋白的,现在要做晶体了,有几件事不明白!1\我的蛋白在大肠中不表达,但是复性很成功,这种复性后的蛋白能做晶体吗?2\蛋白质好象很不稳定,放在4度冰箱容易降解,在-20度冻
我研究神经系统中一个蛋白的作用,因为这个蛋白目前只有零星的功能研究,软件预测此蛋白是一个跨膜蛋白,将将其与GFP融合后转染HEK293细胞,得到的图片如下(120X镜下结果):40X镜
我这批细胞的裂解采用了胞质蛋白和核蛋白分别抽提的方法.蛋白定量发现胞质蛋白的浓度为40ug/ml左右,而核蛋白浓度为15ug/ml左右,western blot时我上样10ul, 问题