WB转膜完毕,从三明治中取出,准备剪开后封闭,没想到就在瞬间,膜就干了,显出一条条清晰的泳道。放进NFM中一个多小时,还是干燥的样子。用的是AMERSHAM 的膜。不知道该怎么办,对结果会有什么影响?
刚开始做western,目的蛋白的分子量为70kDa,装膜用biorad“三明治”,膜的大小约2-3cm2,请问诸位高手装膜的电流量或电压值用多少,装多久比较好?谢谢!
各位前辈, 请问为什么我的WB转膜这个学期以来总出现花的情况,以前考虑没有夹紧的情况,注意了,也尽可能动的幅度小一些,并且三明治的组合和其他同学也是一样的,也和其他同学一起转,别人的不歪我的还是歪
我做了好多次电泳,转膜后都出现这样的现像,请问这是什么原因呢?我觉得可能是做三明治的明胶海棉太老了,中间薄周围厚,有的地方都有了小洞,但别人也是用这些海棉做的,没有出现这种现像。请大家帮助分析
这次跑蛋白转膜出了问题,PVDF膜上转的ladder不够清晰。350mA的电流,三明治的滤纸上没有转过头的ladder。后来找出原因: 电源出现E1错误,转膜过程中有中断,包括水质还有问题,神奇了
各位老师:今天在做“三明治”时,切下胶后,不小心误把胶放在无水乙醇里了,因为无水乙醇和盛缓冲液的皿长的太像,再者自己也没用心,请问老师,我还有必要做下去吗?对后面的影响有多大?谢谢了!
如题,文献报道上有一篇三明治法,如果您了解,渴望分享具体操作流程。因本人实验要求,主动脉瓣膜必须与内皮细胞层完全分离,故选择这种方法,如果您有更好的方法,请不吝赐教!!谢谢!!
半干法恒流电转时滤纸最大会不会造成短路问题?自己做的时候都是滤纸最大,转膜也成功的,求解释。还有转膜的三明治里两边的海绵不是一定会接触吗?这样会不会造成短路问题(应该不会吧,但是为什么?)