我要测胞浆内一种酶的活性,用的化学裂解法,需进行总蛋白定量。裂解液配方如下:50mM Tris.Cl pH8.0,150mM NaCl,100ug/ml PMSF,1ug/ml Aprotinin
本人准备提取大肠杆菌的总蛋白,想请教一下各位,以下方法可以吗?实验内容:将菌摇到一定的OD,然后离心,用PBS洗两遍;之后直接加loading buffer 煮10min;最后离心取上清直接跑胶。
我用碧云天RIPA裂解液(强)裂解大鼠脑组织提取总蛋白,但是我需要检测的是核蛋白,最近做WB没有结果,怀疑核蛋白浓度太低了,看到园子里有战友介绍说可以用差速离心法去除胞浆蛋白,具体方法是怎样的,请
最近做IRS-1,磷酸化抗体都做出来了,但是总蛋白是一片空白。实验条件是湿转300mA 4h,以前是磷酸化做完的膜strip,现在单独跑胶也出不来,不知道该怎么办了,还请大神们指教。
因为我做的就是离子通道,所以觉得不适合选用这个做内参。另外,不知如果用全泳道德总蛋白做内参是否可行,有没有人总总蛋白做内参的?是如何染色的?目前本实验室常用的两种方法为用丽春红染膜(但是效果不够清晰
提核蛋白。我有个问题,既然p-IKBa在胞浆,p-p65在胞核,那么,我直接提总蛋白,不分开提胞浆蛋白和核蛋白是否可以呢?先谢谢各位大侠。