最近做脑组织蛋白的WB,需要从组织中提取蛋白,不知大家都用什么裂解液?我在文献中找到几个,有什么不同?1. 三去污裂解液2. 10 mM Tris-HCl, 1 mM EDTA, and 0.25
我现在先描述一个细菌裂解的protocol:菌体用tris(ph8.0)25mM的蔗糖溶液重悬,然后加入,DNA酶,RNA酶,溶菌酶37度30min,然后加入裂解液(EDTA,脱氧胆酸钠,和尿素
我的实验中有一步是用低熔点琼脂糖包埋线粒体,然后在ESP (0.5M EDTA, pH9.3, 1%十二烷基肌氨酸钠, 0.4mg/ml蛋白酶K) 中裂解,实验一直不尽人意,向各位站友请教几个问题
最近裂解菌,裂解后的上清中自己所要的目的蛋白量非常少,在裂解前加dtt和PMSF ,PH调8,然后加溶菌酶后好长时间不粘稠,之间一直控制PH在8-9,加triton 离心,为什么上清中的蛋白量很少