大家好,我想问一下,如果只想单纯的裂解细菌,使它内部的酶蛋白能裂解出来,可以用什么溶剂呢?只想简单的让它裂解出来,保持一定活性,不要求纯度什么的,现在我是在里边加的曲拉通114?但是裂解效果不怎么
如题,本人是用六孔板培养的肺癌A549细胞,接种后4天提蛋白的时候,发现加了细胞裂解液,冰上震荡10分钟并吹打过后,仍然有大片贴壁细胞未脱落,以为是裂解液的问题,但同样裂解液实验室其他人用了效果
平板中菌落长出来后,没有来得及筛,放在四度冰箱里,渐渐筛选大概第三、四天,裂解液怎么都裂解不开了,ITS都扩不出来,是不是放冰箱有影响。跑胶轻微的引物二聚体,没有条带非常干净,maker清晰。
Ripa加进匀浆管里,用匀浆机裂解组织,拿出来的时候发现整个管子基本都是泡沫,后来放在冰上30min,4度13000rpm 10min吸取上清请问产生这么多泡沫会对提取蛋白有影响吗?