10cm皿大概有10^7个细胞,加1ml裂解液提蛋白,会不会蛋白浓度过低?裂解液过多导致蛋白浓度低,有什么办法提高浓度?
我在提细胞蛋白做western,在培养瓶里加入单去污裂解液(按《分子克隆》二版配的)20多分钟后(期间还用细胞刷刷过)瓶子边缘还有不少细胞贴在瓶底。这样,蛋白浓度必然不高。不知为什么????帮我想想
裂解酵母细胞,并提取质膜蛋白,且该蛋白修饰类型不明。请问建议如何选择裂解成分(NP-40, SDS等),和蛋白酶抑制剂(PIC, PMSF, 磷酸酶抑制剂,去泛素化酶抑制剂等)呢?谢谢!
ACK裂解液处理人的血液得到的有核细胞(白细胞)在显微镜下细胞不规则,看着细胞活性不太好,做细胞培养,72h后已经提不出RNA了,估计细胞都死了。我是想得到白细胞,所以没有用淋巴细胞分离液。1.有神