目的蛋白85kd,内参36kd,所以想用8%的分离胶(线性分离范围30~90kDa)。而买的marker说明书上说要用12%的分离胶,有没有好的办法解决这样的矛盾啊?谢谢!
各位大神,我有一个目的蛋白分子量在200左右,我用百分之八的胶跑的,基本跑到actin位置到底停下的,大概转了2小时,转膜的时候转一整张,然后95-170裁到一起,这个宽度大概一厘米左右吧,老师说宽度
我有几个问题想请教各位老师: 非变性PAGE胶,但是上样缓冲液却也是甲酰胺变性缓冲液啊? 我的困惑是,我如果跑变性PAGE胶的话,是否也用普通的甲酰胺变性缓冲液就可以了?变性PAGE 胶所需的丙烯酰胺
RT,跑了两次,制胶没问题,跑完170都到了玻璃板中下面,然后130,100,溴酚蓝,70都跑不出来就结束之前跑5%可以看到55,maker没问题。试剂的问题ap新配的,会不会是甲叉双丙(29:1)和
大家好,最近一直在做Western Blot, 蛋白质分子量大小为10kda,用12%、10%的分离胶跑胶,发现条带老是跑不出来,组织的这次跑出来了,但是细胞的一直没跑出来,电泳缓冲液和转膜液全是新配
请问各位老师,8%的分离胶是不能用水封吗?加水时感觉水跟胶混到一起了,而做12%的分离胶就没有这个问题。。。。8%的分离胶该用什么封比较好?我看网上有人用无水乙醇,也有用75%的乙醇,这个会对实验结果
看了园子里关于大分子量蛋白200kD以上的western blot经验,也想试一下,现在已经开始用8%sds-page 200V 电泳,打算电泳150min,但是突然想起自己除了要标200kD左右的蛋
marker是能跑到25KDA的,但是之前是在10%的分离胶跑出来的,虽然不是很清晰但是能看出来,这次样品很珍贵要同时孵育35K,289kd的两个抗体,不知道这个分离胶影响大不大呢希望有经验的师兄师姐
本人在做家系的致病基因筛查,在进行8%变性PAGE胶的时候,不知道如何估计跑的时间,不知道是否有专门的DNA的marker??类似于跑蛋白的彩虹marker??