各位大侠,我有个想法。我们用quickchange kit 通过设计含有desirable 位点的一对互补primer来实现定点突变的目的;同样的方法,我们可不可以使用保真性低的DNA聚合酶来对质粒
在微生物的菌种优化和诱变的过程中,我们经常涉及到基因突变和基因突变的检测,在此总结一下基因突变的种类和基因突变的检测方法供战友们参考:基因突变是指由于DNA碱基对的置换、增添或缺失而引起的基因结构
我有一个5kb的质粒想引入一个定点突变之前参照《分子克隆。。。》想用重叠pcr法后来,发现可以用Dpn I酶 来全质粒pcr定点突变,不用试剂盒1.设计一对适合的30多bp的互补引物2.用适当体系
我做1500bp长的DNA的定点突变,我需要变的地方是很顺利的变过来了。挑了一个克隆测序就是。但我原来的序列上又由于酶的原因,引入了两个新的突变,导致氨基酸序列也变了。郁闷坏
想要请教大佬,如果拿到突变体小鼠,如何确定突变位点?克隆突变基因??我的理解是直接外显子测序,然后拿回来数据软件分析,先用BWA进行初始软件测序结果读取,然后用GATK进行突变信息注释
突变检测在不同转录本上结果不一样,一个无意突变,一个有意突变,怎么分析?做的是PARKIN基因的突变检测,测序出一个单核甘酸突变,在一个转录本上其是无意突变,氨基酸没有改变,但是在另外一个转录