诱导表达蛋白,破碎离心,得到上清和沉淀。1.SDS-PAGE检测发现形成包涵体蛋白。2.上清纯化后可以看到一丝丝蛋白。3.表达温度和时间优化后依旧形成包涵体。图1,沉淀跑胶。图2,上清纯化。求求大神
我培养了人角质形成细胞,用sigma公司的LPS产品诱导细胞炎症模型。但是多次检测结果显示,细胞上清液中NO的含量反而比对照组的要低,一定程度上反而出现LPS剂量越大,炎性因子分泌量越少。不知道
各位大神,我现在遇到一个问题,做的纳米抗体,14kd左右,在大肠杆菌中表达,有his标签,条件优化过,测序没有问题,但是就是跑胶看不出来诱导成功,在41-20kd附近都没有明显条带,不知道什么原因
想请问一下园子里的前辈,小弟最近在做心里肥大的课题,用去氧肾上腺素诱导H9C2,用的去氧肾上腺素是100uM,ul(配置方法是16.4mg 去氧肾上腺素用1毫升灭菌dd水溶解,然后50ml高糖培养
用载体pET28-a、pGEX4T-1构建了两个质粒,目的片段615bp,酶切验证送测序都显示质粒构建成功,做小量诱导,但是蛋白表达量很低,IPTG分别设置了0.1mM、0.5mM、1mM、2mM