本人是二年级硕士生,想请教大家关于实验设计的问题:我之前做实验,使用SiRNA抑制了蛋白A,发现蛋白B的mRNA和蛋白水平都下调。同时发现了A抑制之后细胞出现凋亡,而蛋白B之前有人报道过调控凋亡因子
小弟准备从水稻根中提取总蛋白、壁蛋白、膜蛋白、质蛋白和核蛋白,要求最大限度的保持活性,因为后面要做相互作用的实验,要求这些蛋白质保持天然结构即活性。好像有提取植物组织总活性蛋白的试剂盒,不知道提取
最近打算用碧云天的细胞核蛋白和浆蛋白抽提试剂盒提取蛋白,但是一直在疑惑这个试剂盒提出来的就一定是细胞核蛋白或者浆蛋白吗,想问问大家有没有用过什么方法来证实抽提到的蛋白什么位置的?万分感谢!
为了验证PRDM16基因敲除细胞是否构建成功,做了WB实验。1)但是该蛋白位于细胞核,师姐提取的却是总蛋白。为什么不直接提核蛋白呢?2)我很困惑,什么情况下提总蛋白,什么情况下提核蛋白?请大神指教