定量PCR应保证各个样本逆转录率一致,才有可比性。因为逆转录率不好控制,所以常用相同体系进行逆转录,认为其效率相等。我看一些文献上写要保证每管的总RNA量相同,请注意每管都加入等体积的提取的RNA
我应提的RNA有部分降解,所以在逆转录时定量不准第一次我定量8Μg,约3.77μL,做出来低丰度的扩不出来,高丰度的可扩出来,我又做一次,我用6μLRNA,做出来很好,因CDNA用完,我又做了一次
请问 各位师兄师姐:我在逆转录RNA.但是有一个问题:由于我的cDNA的用量比较大.但是我用的promega的反转录系统的说明书是20微升体系.这样就需要用很多管,而且有管间差异.请问有无用更
请教各位做过逆转耐药实验的高手:如K562和K562/A02,在比较逆转倍数时,公式为耐药株IC50/加逆转剂后IC50。请问实验中,逆转耐药组是K562/A02加阿霉素加逆转药物?还是K562/A
本人是新手,请教各位前辈,一般20µl的标准RT体系里,M-MLV一般要加多少个单位?可否提供一个标准的RT体系给本人?因为M-MLV比较贵,加少了怕逆转录不出东西,加多了怕浪费,呵呵,不好