有一个问题要请教各位,SDS-PAGE分离,KCL染色后,切取目的胶条,如何用0.01M pH7.2 PBS粗提蛋白?是不是用0.01M pH7.2 PBS研磨,离心(转速是多少?)、取上清即可
急急急酶可以在表达载体中表达出活性,但是细菌的细胞破壁后粗酶液没有活性,表达的酶需要加的东西都加了为什么还是没有活性是破壁方式有问题么我用的是超声波破碎加入了甘油,DTT,PMSF, EDTA
我用的是RIPA+PMSF(强)裂解细胞,量为200ul/10*6细胞,振荡裂解过程中没有看到有沉淀或絮状物,但高速离心后吸取上清时却发现有鼻涕样清液,不知道这是什么原因造成的?也不知道这是什么东东
我用新鲜肺组织,冰上碾磨、匀浆,加蛋白通用裂解液及PMSF,15000r/min,4度,离心15分钟,得到上清液是红的,比血浆淡一些,怎么回事?对做western blot有影响吗?
我在做培养基中细菌产生蛋白的定量。在由于培养基成分较为复杂,多为农业副产品,多次离心洗涤后,纯化,电泳后都没有条带,不知该如何做,请各位高手指点。具体操作:1.10000rpm离心收集菌体;2.1MN
本人在用考马斯亮蓝G-250测定粗提样品中蛋白质浓度时由于受到样品本身颜色的影响,比色的结果出现负值,即使是正值,样品本身的颜色也对数值有影响。我的样品为菌体发酵液,初步纯化后颜色为棕色,颜色很难
小弟最近在做一个中药阴道泡腾片,请问药材水煎液一般用什么方式过滤更好?处方中有7味药,3味药水提之后浓缩成干膏,另4味药粉成细粉加入。如果放大生产用什么方式过滤最好?