我用的是ripa,裂解Nih-3T3,这次裂解 细胞时每孔加入15ul体积的裂解液,出现鸡蛋白样的粘稠的沉淀,上清很少,接下来想做WB,有木有人帮忙一下?tris-HCl pH7.5 终
细胞裂解提取细胞质的过程中,离心前需用裂解缓冲液(含HEPES、Mgcl2、Kcl、DTT、蔗糖)浸洗细胞,但所查资料均未标明每次浸洗的时间长短(一般都洗3次),请问各位浸洗时间多长为宜?
我的实验中有一步是用低熔点琼脂糖包埋线粒体,然后在ESP (0.5M EDTA, pH9.3, 1%十二烷基肌氨酸钠, 0.4mg/ml蛋白酶K) 中裂解,实验一直不尽人意,向各位站友请教几个问题
大家好! 老师要求裂解酵母菌做SDS-PAGE,看酵母中的蛋白与分泌到培养液中的蛋白是否一致.现在使用蜗牛酶裂解酵母菌,其步骤为:先用巯基乙醇处理半小时,离心沉淀菌,再用山梨醇悬浮,加入