IP后用WB检测目的蛋白,总是杂带,或者没有条带。后面打质谱的话,杂带影响大吗?COIP对抗体有什么特别要求吗,现在用的是IP用的抗体?第一次做,老是出不来目的条带用的dynabeads,有没有
刚刚让上海那边作完了MALDI-TOF,发现鉴定出来的蛋白分子量以及等电点与原始胶上MARKER定的数值差别十分悬殊,那边的解释说MALDI的结果本来就不是很准确,要确定一个蛋白还要做串极,可是文献上
我要做的是用蛋白C的抗体把这个细胞内能与C结合得蛋白拽下来(co-ip),然后对这个复合物得成分通过质谱分析去鉴定,现在鉴定得结果出来了,却发现没有这个抗体拽的蛋白即没有蛋白C,有谁对这方面比较熟悉
我的蛋白经2-DE后,把差异蛋白送到公司打质谱,第一次做了一级,只有55%阳性,我又让公司把二级做了,公司说有70%阳性。我核对了结果,同样一个点一级和二级搜索结果不一致,还有同一个点,一级是阳性
各位大神好,本人利用293T转染目的蛋白(过表达),行IP实验后蛋白样品送质谱检测找相互作用蛋白。送了两个样品(对照、过表达),回报结果蛋白是半定量的。发现两个样品中好多蛋白在对照和过表达样品中
我现在用MALDI质谱做了一批银染的点,我估计他们大部分的量在50-100ng之间,结果很差,没打出几个好的肽谱,操作步骤是这样的:先脱银,再用乙腈脱水,然后加酶,加酶的量大约10ng。4 度吸涨