Ripa加进匀浆管里,用匀浆机裂解组织,拿出来的时候发现整个管子基本都是泡沫,后来放在冰上30min,4度13000rpm 10min吸取上清请问产生这么多泡沫会对提取蛋白有影响吗?
打算测定细胞MDA SOD含量, 实验室没有条件超声破碎,只能用triton x-100裂解细胞,可该试剂裂解的时间是多长?还有加入的triton x 100的量是多少?有没有做过的或者最近在做
平板中菌落长出来后,没有来得及筛,放在四度冰箱里,渐渐筛选大概第三、四天,裂解液怎么都裂解不开了,ITS都扩不出来,是不是放冰箱有影响。跑胶轻微的引物二聚体,没有条带非常干净,maker清晰。
请问大家,测定细胞内蛋白含量,需要先将细胞裂解,那么不同密度的细胞和所用裂解液的量怎么搭配?如果把细胞以每孔10万个接种到24孔板,那每孔细胞(10万个)应该加多少裂解液呢?还有,请问斑竹
我在做一种比较新的蛋白(之前没有研究报道),焦头烂额的。在细胞里面过表达这种蛋白质,用RIPA(强)裂解之后做WB一直无法检测到,一直以为是过表达不成功,结果用尿素裂解液就做出来了。想问问各位大神
我用的是碧云天的SDS裂解液裂解细胞提蛋白,SDS裂解液从-20℃拿出,4℃融化,融化之后是裂解液浑浊的,所以就在常温下放置几分钟再用于细胞裂解,放在冰上裂解之后又变浑浊了。搜集之后-20℃保存
RIPA细胞裂解液配置最近在做细胞裂解,我要测的指标在细胞里比较低,200万个细胞加了200ul试剂盒的裂解液后吸光度只有0.1几,准度很低,现在想自己配裂解液,我看市面上都是1%Triton,0