求助,没有实验经验,不懂的东西太多了。小提获取的质粒需要查资料然后酶切吗,然后琼脂糖凝胶电泳看哪儿个条带大小符合。还是可以不酶切,直接和原质粒进行琼脂糖凝胶电泳大致对比。完成琼脂糖凝胶电泳后有必要送
目的基因300多碱基,测序缺失的碱基大概在上游引物3端 后面十几个碱基,除了少了17个碱基之外其他碱基全部比对成功,到底是测序的问题还是我的质粒构建的问题
本人对这些病毒,质粒一窍不通,最近偶然知道实验室包病毒一直包的是逆转录病毒pQCXIH,使用包装质粒GPE,和包膜蛋白质粒VSV-G,一起转染进293T,转染试剂是polyjet,最近想做新的过表达
最近一直在做蓝白斑筛选,平板上可以长出蓝色和白色菌落,但是进行质粒抽提后,进行测序发现没有目标序列,并且每次都没有(哭死啊真的做好久了求求大家帮帮忙),而且发现板子上的蓝白斑菌落都是蓝斑很多,白斑
用DH5a细菌做感受态转化目的质粒,共转化四个,四个质粒小提和酶切都成功,但是第二天质粒大提只有一个能稳定提出来,其他的一直提不出来。质粒大提摇菌步骤,100ul细菌冻存液和加了抗生素的3mlLB
为进行重组质粒的筛选,通常将环化的重组质粒转化到大肠杆菌感受态中,利用质粒不相容性质挑选单克隆(这解答了很多同学的问题“连接上的质粒和空载会不会转到同一质粒”);利用质粒复制特性,带origin
细胞转染质粒过表达某个基因,RT-PCR结果显示质粒转进去了且转染效率很高,但是WB结果没有趋势,没有过表达的效果。想请教一下出现这种情况的原因以及解决方法。感谢
1.质粒抗性会在没有抗性培养基条件下消失吗(不复制)2.做热激转化后筛选阳性菌,当我平板上抗性浓度不够,有阳性和假阳性菌,我可以把平板上菌冲下来,再次涂抗性板得到阳性菌吗谢谢各位,本人新手小白一个
细胞转染的自带GFP标记的膜蛋白的质粒,爬片染色后,发现在细胞核附近有很强的绿光,这是为什么呢?大家有谁出现相同情况吗?怎么解决呢?图1:转的1ug空载PEGFP-C1图2:转的1ug PEGFP