想请教各位战友,在胰岛中提取总蛋白做western时用什么方法比较好呢?我之前用200ulRIPA裂解1000个胰岛(加入裂解液,混匀,四度置于冰上30min),但是发现目的蛋白根本没有裂解到上清中
我培养的胰岛细胞:24小时转皿,培养于RPMI1640+10%FBS中,现在长的细胞为贴璧的多角形、梭形细胞,生长速度比较快。查看文献有的说胰岛细胞呈圆形 椭圆形。有的说胰岛细胞呈上皮样细胞生长
本人想做一些细胞因子干扰胰岛素分泌的原代细胞实验,查文献有用HIT-T15(仓鼠beta胰岛细胞株)细胞株、胰岛细胞瘤细胞株等做实验的,而原代分离的却都是胰岛(包括胰岛移植时)本人有些不解