有没有人用普通逆转录酶去逆转录microRNA呢?ABI针对每个microRNA做一个kit,价格不菲;Qiagen和Takara用poly A加尾方法做kit,缺点是不能有效区分前体和成熟体
本实验室逆转录的试剂都是promega的,以前只做过mRNA逆转,这次想逆转miRNA,不知道该用怎样的protocol。我搜了一些,但是没有找到。有没有达人做过,谢过了。
请教一下,我是新手,刚开始做miRNA荧光定量。内参是5sRNA,3个待测miRNA。逆转录用的茎环引物。请教,逆转录的时候,是将4种逆转录引物混合在一起,还是单管逆转录?混合逆转录,之前做预实验
总之犯了个特别二的错误,做逆转录最后一步是45度一小时,70度十分钟,因为有别的事情就把下一个温度设在了4度一小时,因为觉得这一小时以内肯定就拿出来了…但是这个温度设置我是在一个普通pcr的程序上改