我想重新转化一质粒,担心以前的菌退化之类的.然后长出很多克隆，挑其中一个提质粒，结果和我以前的某质粒相同。晕了，作了两三次了。再怎么着也和其他质粒无关阿。
请问各位前辈，遇到的一个问题就是RP4质粒转化，质粒大小为60kb，我选择用Trans5α感受态细胞，严格按照该细胞感受态说明书操作，已经五天了，筛选平板上可是却没有菌落生长，是质粒太大，不好转进去
昨天构了一个载体，酶连之后，转化，复苏，最后涂板子，过夜后一个没长，（之前做的菌P阴性都还长了好几个）板子氨苄浓度100ug/ml，我又涂了100ul 100mg/ml的氨苄母液，不知道是不是因为氨苄