二、菌落制备主要环节(四)转化8、制备加抗生素的LB琼脂平板:取出50℃预热的灭菌LB琼脂培养基,按照终浓度100 ug/ml加入抗生素,摇匀,将LB培养基倒入灭菌的培养皿中,15-20ml/平皿。待
一、操作前准备1. 仪器设备PCR仪、37℃恒温培养箱、37℃恒温摇床、水浴锅、超净工作台、高速离心机等等。2. 试剂过表达载体质粒(pGL3-Basic等)、限制性内切酶、胶回收试剂盒、感受态大肠
刚刚开始接触分子克隆,有很多问题请问各位高手,质粒中很多features,比如说CMV promoter、CMV enhancer、SV40 promoter、SV40 ori、HSV TK
您好!我们用DH5a提取目标质粒、空质粒、内参质粒,用氨苄固体培养基划板转化的菌落挺好,用液体氨苄培养基扩增通常15h就混了,现在试了两种质粒提取试剂盒,质粒最终浓度总是在50-300ng/ul之间
不同质粒在同一大肠杆菌中共存需要,两个质粒利用不同的“复制系统”。请问:什么是质粒的复制系统呢?质粒利用什么复制系统是不是由复制起始点决定的?一共有多少种复制系统?严谨型和松弛型质粒和这个“复制系统
对pSliencer2.1-U6 neo质粒用BamH1 和Hind3 两种酶双酶切, 之后对酶切产物回收, 再将回收产物与目的片段连接作转化,图板, 过夜后, 取板上菌做菌落PCR, 用100bp